液相色譜（HPLC） 法測血清維生素C 含量.pdf

極易氧化, 這使其測定具有很大難度。據報道, 測定
維生素C 常用以氧化還原為基礎的比色法或衍生
反應為基礎的熒光法, 但這些方法操作復雜費時,
在樣品處理過程中很容易使維生素C 損失, 且沒
有高的靈敏度和度[ 1, 2 ]。為了尋找更好的維生
素C 測定方法, 使其更適用于社區或流行病學研
究, 筆者通過對色譜條件的優化, 建立了使用先進
的二極管陣列檢測器（DAD） 的液相色譜（h igh
perfo rm ance liqu id ch rom atography, HPLC） 法。該
方法具有簡便、快速、準確、靈敏的特點。
1　材料與方法
111　材料
11111　主要儀器: Beckm an 液相色譜系統:
Novean 色譜工作站, 168 型二極管陣列檢測器
（DAD ） , ALL T IMA ODS# C18 柱5 L（250 mm ×
416 mm i. d） , 7752i 手動進樣器;DL 2120 超聲波清
洗器; GTL 216AL 高速臺式低溫離心機。
11112　試劑: 維生素C （S IGMA , Chem Co,U SA ,
色譜純） ; 磷酸二氫鉀、磷酸、甲醇、偏磷酸, 以上試
劑均為分析純; 實驗用水為去離子雙蒸餾水。
112　方法
11211　色譜條件的優選: 根據對流動相的種類、濃
度及pH 值的優選, 本實驗的*色譜條件為: 色
譜柱: ALL T IMA ODSC18 柱5 L（ 250 mm × 416
mm i. d） ; 流動相: 100mmo l?L KH2PO 4, pH 3. 00,
檢測波長: 243 nm ; 流速: 1 m l?m in; 進樣量: 20Ll。
11212　樣品預處理: 取011m l 血清, 加